本发明提供一种虾蛄眼球石蜡切片的制备方法，包括以下步骤：步骤一：取材：步骤二：固定的选择：用4‑6%多聚甲醛室温固定25‑35min；步骤三：脱水处理；步骤四：用改性石蜡体包埋浸蜡后的组织块；步骤五：采用切片机对样品进行连续切片；步骤六：在37℃水浴中将切片摊平；步骤七：37℃孵育6‑12小时后进行脱蜡复水；步骤八：对样品进行染色后，使用50%的甘油无菌水溶液对样品进行封片保存。本发明琴虾蛄眼球石蜡切片的制备方法，包括虾蛄眼球外壳的解剖、固定剂的选择、脱水、透蜡等程序的改进优化，突破了虾蛄眼球因外壳难以解剖导致的脱水透蜡不彻底、外壳过硬损坏刀刃、切片产生碎片等技术瓶颈。