本发明属于干细胞三维培养技术领域,具体涉及一种促进犬间充质干细胞三维聚集体形成的培养基及三维动态扩增方法,所述培养基包括2D培养基、聚乙烯醇和ROCK抑制剂Y27632,聚乙烯醇的质量浓度为0.01%‑0.05%,Y27632的浓度为10μM。无需支架材料,本发明使用PVA和ROCK抑制剂Y27632,借助AggreWell孔板离心,提升MSC单细胞形成3D聚集体或3D球体的效果,完成动态体系扩增;经验证,MSC 3D聚集体培养后细胞特征和功能优于2D平面培养的MSC,动物实验表明,3D MSC细胞具有促进糖尿病难愈性伤口愈合的能力。 |